1光照消毒灭菌法
主要是根据紫外线破坏细菌菌体蛋白质中的氨基酸,使菌体蛋白质发生光解、变性,或菌体DNA失去转化能力,或降低菌体内氧化酶的话性,导致细菌死亡而产生灭菌作用。紫外线对霉菌杀菌作用最强,对杆菌杀菌作用较强,对球菌杀菌作用较弱,对真菌几乎不起作用。紫外线对生长期的细菌杀菌效果最好,对芽孢杆菌杀菌效果不强。根据光线不同可分为以下几种:
(1)太阳光直接照射法。强烈的太阳光紫外线较强,对细菌有一定的杀伤力,同时还具有加热、干燥的作用,影响细菌的生长繁殖,达到杀菌目的。常用于草料、工作服、绳索、整理箱、包布等消毒,将这些物品在阳光下晾晒3h以上,中间翻动几次。
(2)紫外线灯管消毒法。一般是在小的密闭空间里,将紫外线灯管悬挂在上方,空气消毒时,每10m安装一支30W的灯管,有效距离不超过1.5m,照射时间1~2h;物品消毒时,有效距离不超过0.3~0.5m,照射时间 1th以上,物品应打开,光线能照到。紫外线灯管消毒时应保持灯管干净整洁,定期用酒精消毒,消毒的空间必须千燥、清洁、密闭,温度30℃左右、湿度50%左右。紫外线对皮肤、眼睛有刺激作用,人及家畜不能用紫外线灯管长时间照射,照射后要打开门窗通风。
(3〕臭氧灭菌灯消毒法。在灭菌灯管内装入臭氧发生管,在电场的作用下将空气中的氧气转换成高纯度的臭氧,产生强大的氧化能力来杀灭细菌。主要用于水、物品表面的消毒。臭氧对人体损失严重,人员及家畜应远离,消毒时需要密闭门窗,消毒后打开门窗0.5h后人员方可进入。
利用高温破坏病原菌的细胞壁、细胞膜、蛋白质、核酸等使其死亡。根据加热的类型可分为干热灭菌法和湿热灭菌法。2.1干热消毒灭菌法
干热灭菌法是由空气导热,对物品进行加热,传热较慢。根据使用方法又分为燃烧法和干烤法。
(1)】燃烧法是一种直接、简单、迅速、彻底的灭菌方法。适应于对废弃物、病料及包装物、病理标本、污染物等物品的处理,也可用于传染性强的病死家畜尸体,实验室内接种用的接种环,用于实验动物的笼子、鼠罐,发生传染性疾病的笼、舍、墙面等。应用时直接将物品用火烧即可。
(2)干热法是将物品放在灭菌箱内进行灭菌,其热力传播与穿透主要是靠空气对流和介质的传导达到杀灭细菌的目的,灭菌彻底可靠。适用于试管、烧杯、三角瓶、吸管等在高温环境下不变形、不变质、不损坏的玻璃或金属、陶瓷制品以及培养基、废弃的培养基、培养液、病料等。干热灭菌需要的时间和温度可根据消毒灭菌的物品来决定。
2.2湿热消毒灭菌法
湿热消毒灭菌法是由空气和水蒸汽导热,其传热快,穿透力强。根据使用方法可分为煮沸消毒法和压力蒸汽灭菌法。
(1)煮沸消毒法是一种应用最早、最简单、最经济的消毒方法之一。适用于金属、玻璃、陶瓷、橡胶等耐高温、耐热的物品消毒,消毒时将灭菌的物品刷洗干净全部放入水中加热,烧开,煮沸时间8~10min,晾凉,取出即可。
(2)压力蒸汽灭菌法是实验室经常使用的灭菌方法,应用广泛,是利用饱和水蒸汽的高压高热所释放的潜热达到对细菌杀灭的目的。适用于各种器械、玻璃器材、陶瓷、敷料、手术用品、橡胶制品、培养基、培养液、病料等等都可以用此方法灭菌。压力燕汽灭菌法有下排气式压力蒸汽灭菌器和预真空压力蒸汽灭菌器。下排气式压力爇汽灭菌图是利用重力置换的原理使热的水蒸汽在灭菌器中从上往下流动,将冷空气从下排气孔排出。下排气式压力蒸汽灭菌器有卧式和手提式两种,卧式压力蒸汽灭菌器容量大,适用于多量品的灭菌;手提式爇汽灭菌器容量小,适用于少量物品的灭菌,但可以移动,便于携带,使用方便;使用时压力120k Pa、30min]J可达到完全灭菌的效果。预真空压力熬汽灭菌器是利用机械将灭菌器内空气抽真空先形成负压,然后再输入水蒸汽,水蒸汽在负压的吸引下快速进入到灭菌物品的内部,从而达到灭菌的目的;使用时压力205.8k Pa、10min即可达到完全灭菌的效果。